实验类别：基础教育课程实验 实验课程名称：生物化学实验技术

实验室名称：基因工程实验室 实验课程编号：N02040612S

总学时： 32 学 分： 2

适用专业：生物工程、制药工程

先修课程：化学、生物学

一、 课程在教学计划中地位、作用；

生物化学实验技术是生化教学重要的组成部分。生化实验技术广泛用于生命科学许多领域研究。生命科学的很多课程，都是以生物化学理论和实验技术作为基础的。因此，它是生命科学中不可缺少的专业基础课。

二、 课程内容、基本要求：

通过实验加深学生对生物化学基本理论的理解。要求学生掌握比色、层析、电泳、离心等生物化学基本实验方法的原理和操作技能，学会选择正确的方法进行生物材料中多种物质的分离、提纯及鉴定，培养学生严谨的科学态度分析、解决问题的能力。根据实际情况选择8个实验，学时数为32学时。

实验一、DNS（3，5-二硝基水杨酸）比色法测定还原糖

实验内容：

1．制作葡萄糖标准曲线

2．样品中还原糖的提取

3．样品中还原糖的测定

基本要求：

掌握还原糖测定的基本原理，比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。

实验二、氨基酸的纸层析

实验内容：

1．配制试剂

2．点样、层析、染色

3．计算迁移率

基本要求：

了解并掌握氨基酸纸层析的原理和方法，纸层析分离、鉴定氨基酸的操作技术。

实验三、醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白

实验内容：

1．处理醋酸纤维薄膜

2．制作滤纸桥

3．点样、电泳、染色、干燥

基本要求：

掌握醋酸薄膜电泳技术分离蛋白质的基本原理、电泳的一般操作技术，会解释蛋白电泳的结果与分析。

实验四、影响酶作用的因素

实验内容：

1．唾液淀粉酶的采样

2．温度对淀粉酶活性的影响

3. pH对淀粉酶活性的影响

4. 激活剂对淀粉酶活性的影响

5. 抑制剂对淀粉酶活性的影响

基本要求：

了解温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。

实验五、蛋白质的盐析沉淀和变性反应

实验内容：

1．蛋白质的盐析

2．重金属离子沉淀蛋白质

3．某些有机酸沉淀蛋白质

4．有机溶剂沉淀蛋白质

5．乙醇引起的变性与沉淀

基本要求：

了解和掌握沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义，蛋白质变性与沉淀的关系。

实验六、卵磷脂的提取与鉴定

实验内容：

1．卵磷脂的提取

2．卵磷脂的鉴定

基本要求：

掌握卵磷脂的提取方法及其鉴定方法。

实验七、淀粉酶活性测定（3，5-二硝基水杨酸比色法）

实验内容：

1．麦芽糖标准曲线的制作

2．淀粉酶液的制备

3．a-及β-淀粉酶总活力的测定

基本要求：

掌握淀粉酶提取、测定其活性的原理方法，酶活性的表示方法。

实验八、粗脂肪的提取与检测

实验内容：

1．安装索氏脂肪抽提器

2．用索氏抽提器测定样品脂肪含量

基本要求：

掌握脂类物质的索氏提取的原理和基本操作方法，学会粗脂肪的检测方法和结果分析。

三、 学时分配

四、主要参考书

1、蒋立科，罗曼主编，《生物化学实验设计与实践》，高等教育出版社，2007

2、王金胜主编，《生物化学研究技术》，中国农业出版社，2001

3、余冰宾主编，《生物化学实验指导》，清华大学出版社，2004

4、丛峰松主编，《生物化学实验指导》，上海交通大学出版社，2005

五、考核方式（包括作业、测验、考试等及其所占比例）

实验考核采用实验过程考核50%和实验报告考核50%。实验过程考核主要包括预习报告、实验纪律、实验操作和记录；实验报告考核主要包括报告格式、内容、结果分析与讨论、思考题。